2 × Taq PCR MasterMix Ⅱ
איינריכטונגען
■ הויך אַמפּלאַפאַקיישאַן עפעקטיווקייַט: דנאַ פראַגמאַנץ פון פאַרשידענע סיזעס (נידעריקער ווי 5 קב) און קוואלן קענען זיין אַמפּלאַפייד יפעקטיוולי.
■ הויך סענסיטיוויטי: פֿון גענאָמיק טעמפּלאַטעס קענען זיין אַמפּלאַפייד דורך 10 ג ציל פראַגמענץ.
■ הויך דרוק קעגנשטעל: פֿאַר טעמפּלאַטעס מיט הויך טומע אינהאַלט אַזאַ ווי פּראָסט-יקסטראַקטיד מוסטער/באַקטיריאַל קולטור, די ציל פראַגמענט קענען זיין אַמפּלאַפייד לייכט. די פּאָלימעראַס טעטיקייט וועט נישט זיין אַפעקטאַד דורך ריפּיטיד ייַז קאַלט און טאָינג.
■ באַקוועם פֿאַר אַפּלאַקיישאַנז: דער אָפּרוף סיסטעם איז געווען גרינג און געשווינד צוגעגרייט. די אַמפּלאַפייד פראַגמענט כּולל די 3 ′ סוף דאַ-אָוווערכאַנג, וואָס איז באַקוועם פֿאַר טאַ קלאָונינג.
ספּעציפיקאַציע
טיפּ: טאַק דנאַ פּאָלימעראַסע
מוסטער: פּיוראַפייד/פּראָסט-יקסטראַקטיד מוסטער/באַקטיריאַל קולטור
מוסטער: > 10 פּג
פראַגמענט גרייס: <5 קב
אַפּפּליקאַטיאָנס: פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן פון דנאַ פראַגמאַנץ, דנאַ לייבלינג, אָנפאַנגער געשפּרייט, סיקוואַנס פעסטקייַט, גרויס-וואָג דזשין דיטעקשאַן, האַלב-קוואַנטיטאַטיווע פּקר יקספּעראַמאַנץ, דיטעקשאַן פון שפּור דנאַ, עטק.
כל די פּראָדוקטן קענען זיין קאַסטאַמייזד פֿאַר אָדם/אָעם. פֿאַר פרטים,ביטע גיט קאַסטאַמייזד סערוויס (אָדם/אָעם)
 |
פיגורע 1. טעמפּלאַטעס פֿון פאַרשידענע קוואלן זענען אַמפּלאַפייד דורך TIANGEN Taq MasterMix II און דער פּראָסט טאַק מיקס פון סאַפּלייער TR ריספּעקטיוולי צו דעטעקט די דרוק קעגנשטעל פון די רייידזשאַנץ. די רעזולטאַטן ווייַזן אַז TIANGEN פּראָדוקטן קענען אַמפּלאַפיי די ציל פראַגמאַנץ פֿון גראָב גענאָמיק טעמפּלאַטעס און באַקטיריאַל קולטור, און די דרוק קעגנשטעל איז בעסער ווי די פון סאַפּלייער TR. א: גראָב גענאָמיק מוסטער יקסטראַקטיד דורך TIANGEN TIANcombi DNA Lyse & Det PCR קיט. פּרפּ/דן: גראָב יקסטראַקשאַן און דיטעקשאַן פון מענטשלעך בלוט סאַמפּאַלז. רייַז: גראָב יקסטראַקשאַן און דיטעקשאַן פון רייַז סאַמפּאַלז. ב: קאָלאָני פּקר. די פּקר פראַגמענט איז 700 בפּ. ב: טיאַנגען מאַרקער ווו |
 |
גוטע וניווערסאַליטי פֿאַר טעמפּלאַטעס פֿון פאַרשידענע קוואלן און מיט פאַרשידענע לענגקטס פיגורע 2. פראַגמענץ פון פאַרשידענע קוואלן און לענגקטס זענען אַמפּלאַפייד מיט TIANGEN Taq מאַסטערמיקס וו (א) און געוויינטלעך Taq מישן פון סאַפּלייער טק (ב), סאַפּלייער טר (C), סאַפּלייער V (ד) און סאַפּלייער ג (E) ריספּעקטיוולי. די רעזולטאַטן ווייַזן אַז די פולשטענדיק פאָרשטעלונג פון TIANGEN פּראָדוקטן איז דער בעסטער אין טערמינען פון אַמפּלאַפאַקיישאַן פיייקייט, ספּעסיפיסיטי און וניווערסאַליטי. M: TIANGEN Marker III1: Soybean genomic DNA template (120 bp); 2-3: גענאָמיק דנאַ מוסטער פון רייַז (694 בפּ, 2258 בפּ); 4: גענאָמיק דנאַ מוסטער פון וואַטע (200 בפּ); 5: Escherichia coli גענאָמיק דנאַ מוסטער (2298 בפּ); 6-7: מויז דזשינאָום דנאַ מוסטער (1 קב, 2 קב); 8-10: גענאָמיק דנאַ מוסטער פון שטשור (1 קב, 2 קב, 2080 בפּ); 11-18: מענטשלעך דזשינאָום דנאַ מוסטער (300 בפּ, 448 בפּ (גק%: 74.8%), 1100 בפּ, 750 בפּ, 1000 בפּ, 1090 בפּ (גק%: 70.4%), 2 קב, 4 קב) |
 |
הויך סענסיטיוויטי פיגורע 3. פאַרשידענע קאַנסאַנטריישאַנז פון שטשור און מענטשלעך דנאַ פראַגמאַנץ זענען אַמפּלאַפייד ניצן טיאַנגען Taq מאַסטערמיקס וו (א), געוויינטלעך Taq אַ קאָמבינאַציע פון סאַפּלייער V (ב) און סאַפּלייער טק (C) ריספּעקטיוולי צו דעטעקט די אַמפּלאַפאַקיישאַן סענסיטיוויטי. די רעזולטאַטן ווייַזן אַז TIANGEN פּראָדוקט קען אַמפּלאַפיי די ציל פראַגמענט פֿון די דזשינאָום מוסטער אַזוי נידעריק ווי 0.01 נג, און די סענסיטיוויטי איז בעסער ווי די פּראָדוקטן פֿון סאַפּלייער V און TK.M: TIANGEN מאַרקער III, N: NTC טעמפּלאַטע אַרייַנשרייַב 1-8 : 200 נג, 100 נג, 50 נג, 20 נג, 10 נג, 1 נג, 0.1 נג, 0.01 נג. |
א -1 מוסטער
■ דער מוסטער כּולל פּראָטעין ימפּיוראַטיז אָדער טאַק ינכיבאַטערז עטק .—— רייניקן דנאַ מוסטער, באַזייַטיקן פּראָטעין ימפּיוראַטיז אָדער עקסטראַקט מוסטער דנאַ מיט רייניקונג קיץ.
■ די דענאַטוראַטיאָן פון די מוסטער איז נישט גאַנץ —— אַפּראָופּרייטלי פאַרגרעסערן דענאַטוראַטיאָן טעמפּעראַטור און פאַרלענגערן דענאַטוראַטיאָן צייט.
■ דערנידעריקונג פון מוסטער —— גרייטן דעם מוסטער צוריק.
א -2 אָנפאַנגער
■ נעבעך קוואַליטעט פון אָנפאַנגער —— סינטאַסייז ווידער די אָנפאַנגער.
■ דערנידעריקונג פון אָנפאַנגער —— עלימינירן די הויך קאַנסאַנטריישאַן פּרימערס אין אַ קליין באַנד פֿאַר פּרעזערוויישאַן. ויסמיידן קייפל ייַז קאַלט און טאָינג אָדער לאַנג-טערמין 4 ° C קריאָפּרעסערוועד.
■ ינאַפּראָופּרייט פּלאַן פון אָנפאַנגער (למשל אָנפאַנגער לענג איז נישט גענוג, דימער געשאפן צווישן אָנפאַנגער, עטק.) -רידיזיין אָנפאַנגער (ויסמיידן פאָרמירונג פון אָנפאַנגער דימער און צווייטיק סטרוקטור)
א -3 מג2+קאָנצענטראַציע
■ מג2+ קאַנסאַנטריישאַן איז צו נידעריק —— רעכט פאַרגרעסערן Mg2+ קאַנסאַנטריישאַן: אָפּטימיזע די מג2+ קאַנסאַנטריישאַן דורך אַ סעריע פון ריאַקשאַנז פון 1 ממ צו 3 ממ מיט אַ מעהאַלעך פון 0.5 ממ צו באַשטימען די אָפּטימאַל מג2+ קאַנסאַנטריישאַן פֿאַר יעדער מוסטער און אָנפאַנגער.
א -4 אַנילינג טעמפּעראַטור
■ די הויך אַנילינג טעמפּעראַטור אַפעקץ די ביינדינג פון אָנפאַנגער און מוסטער. - רעדוצירן די אַנילינג טעמפּעראַטור און אַפּטאַמייז די צושטאַנד מיט אַ גראַדיענט פון 2 ° C.
א -5 עקסטענסיאָן צייט
■ קורץ פאַרלענגערונג צייט —— פאַרגרעסערן די פאַרלענגערונג צייט.
פענאָמענאַ: נעגאַטיוו סאַמפּאַלז אויך ווייַזן די ציל סיקוואַנס באַנדס.
א -1 קאַנטאַמאַניישאַן פון פּקר
■ קרייז קאַנטאַמאַניישאַן פון ציל סיקוואַנס אָדער אַמפּלאַפאַקיישאַן פּראָדוקטן —— קערפאַלי נישט צו שטעלן די מוסטער מיט די ציל סיקוואַנס אין די נעגאַטיוו מוסטער אָדער פאַרגיסן זיי פֿון די סענטריפוגע רער. די רייידזשאַנץ אָדער ויסריכט זאָל זיין אַוטאָקלאַוועד צו עלימינירן יגזיסטינג נוקלעיק אַסאַדז, און די עקזיסטענץ פון קאַנטאַמאַניישאַן זאָל זיין באשלאסן דורך נעגאַטיוו קאָנטראָל יקספּעראַמאַנץ.
■ רייידזשאַנט קאַנטאַמאַניישאַן —— אַליקאָט די רייידזשאַנץ און סטאָרז ביי נידעריק טעמפּעראַטור.
א -2 פּרייםr
■ מג2+ קאַנסאַנטריישאַן איז צו נידעריק —— רעכט פאַרגרעסערן Mg2+ קאַנסאַנטריישאַן: אָפּטימיזע די מג2+ קאַנסאַנטריישאַן דורך אַ סעריע פון ריאַקשאַנז פון 1 ממ צו 3 ממ מיט אַ מעהאַלעך פון 0.5 ממ צו באַשטימען די אָפּטימאַל מג2+ קאַנסאַנטריישאַן פֿאַר יעדער מוסטער און אָנפאַנגער.
■ ימפּראַפּער אָנפאַנגער פּלאַן, און דער ציל סיקוואַנס האט האָמאָלאָגי מיט די ניט-ציל סיקוואַנס. —— ווידער-פּלאַן פּרימערס.
פענאָמענאַ: די פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן באַנדס זענען סתירה מיט די דערוואַרט גרייס, אָדער גרויס אָדער קליין, אָדער טייל מאָל אַ ספּעציפיש אַמפּלאַפאַקיישאַן באַנדס און ניט-ספּעציפיש אַמפּלאַפאַקיישאַן באַנדס פּאַסירן.
א -1 אָנפאַנגער
■ נעבעך אָנפאַנגער ספּעסיפיסיטי
—— ווידער-פּלאַן אָנפאַנגער.
■ די אָנפאַנגער קאַנסאַנטריישאַן איז צו הויך —— רעכט פאַרגרעסערן די דענאַטוראַטיאָן טעמפּעראַטור און פאַרלענגערן די דענאַטוראַטיאָן צייט.
א -2 מג2+ קאָנצענטראַציע
■ די מג2+ קאַנסאַנטריישאַן איז צו הויך —— ריכטיק רעדוצירן די Mg2+ קאַנסאַנטריישאַן: אָפּטימיזע די מג2+ קאַנסאַנטריישאַן דורך אַ סעריע פון ריאַקשאַנז פון 1 ממ צו 3 ממ מיט אַ מעהאַלעך פון 0.5 ממ צו באַשטימען די אָפּטימאַל מג2+ קאַנסאַנטריישאַן פֿאַר יעדער מוסטער און אָנפאַנגער.
א -3 טערמאָסטאַבלע פּאָלימעראַסע
■ יבעריק סומע פון ענזיים —— רעדוצירן די סומע פון ענזיים צונעמען אין ינטערוואַלז פון 0.5 יו.
א -4 אַנילינג טעמפּעראַטור
■ די אַנילינג טעמפּעראַטור איז צו נידעריק —— אַפּראָופּרייטלי פאַרגרעסערן די אַנילינג טעמפּעראַטור אָדער אַדאַפּט די צוויי-בינע אַנילינג אופֿן
A-5 פּקר סייקאַלז
■ צו פילע פּקר סייקאַלז —— רעדוצירן די נומער פון פּקר סייקאַלז.
א -1 אָנפאַנגער—— נעבעך ספּעסיפיסיטי —— רע-פּלאַן די אָנפאַנגער, טוישן די שטעלע און לענג פון די אָנפאַנגער צו פאַרבעסערן זייַן ספּעסיפיסיטי; אָדער דורכפירן נעסטעד פּקר.
א -2 מוסטער דנאַ
—— די מוסטער איז נישט ריין —— רייניקן די מוסטער אָדער עקסטראַקט דנאַ מיט רייניקונג קיץ.
א -3 מג2+ קאָנצענטראַציע
—— מג2+ קאַנסאַנטריישאַן איז צו הויך —— רעכט רעדוצירן מג2+ קאַנסאַנטריישאַן: אָפּטימיזע די מג2+ קאַנסאַנטריישאַן דורך אַ סעריע פון ריאַקשאַנז פון 1 ממ צו 3 ממ מיט אַ מעהאַלעך פון 0.5 ממ צו באַשטימען די אָפּטימאַל מג2+ קאַנסאַנטריישאַן פֿאַר יעדער מוסטער און אָנפאַנגער.
א -4 דנטפּ
—— די קאַנסאַנטריישאַן פון דנטפּס זענען צו הויך —— רעדוצירן די קאַנסאַנטריישאַן פון דנטפּ אַפּראָופּרייטלי
א -5 אַנילינג טעמפּעראַטור
—— צו נידעריק אַנילינג טעמפּעראַטור —— אַפּראָופּרייטלי פאַרגרעסערן די אַנילינג טעמפּעראַטור
א -6 סייקאַלז
—— צו פילע סייקאַלז —— אָפּטימיזע די ציקל נומער
דער ערשטער שריט איז צו קלייַבן די צונעמען פּאָלימעראַסע. רעגולער טאַק פּאָלימעראַסע קענען ניט פּרופריד ווייַל פון פעלן פון 3'-5 'עקסאָנוקלעאַסע טעטיקייט, און מיסמאַטש וועט שטארק רעדוצירן די פאַרלענגערונג עפעקטיווקייַט פון פראַגמאַנץ. דעריבער, רעגולער טאַק פּאָלימעראַסע קענען נישט יפעקטיוולי אַמפּלאַפיי ציל פראַגמאַנץ גרעסער ווי 5 קב. טאַק פּאָלימעראַסע מיט ספּעציעל מאַדאַפאַקיישאַן אָדער אנדערע הויך -פאַדעלאַטי פּאָלימעראַס זאָל זיין אויסגעקליבן צו פֿאַרבעסערן די פאַרלענגערונג עפעקטיווקייַט און טרעפן די באדערפענישן פון אַ לאַנג פראַגמענט אַמפּלאַפאַקיישאַן. אין אַדישאַן, די אַמפּלאַפאַקיישאַן פון לאַנג פראַגמאַנץ אויך ריקווייערז קאָראַספּאַנדינג אַדזשאַסטמאַנט פון אָנפאַנגער פּלאַן, דענאַטוראַטיאָן צייט, פאַרלענגערונג צייט, באַפער pH, עטק. כּדי צו פאַרמיידן מוסטער שעדיקן, די דענאַטוראַטיאָן צייט ביי 94 ° C זאָל זיין רידוסט צו 30 סעק אָדער ווייניקער פּער ציקל, און די צייט צו העכערונג טעמפּעראַטור צו 94 ° C איידער אַמפּלאַפאַקיישאַן זאָל זיין ווייניקער ווי 1 מין. דערצו, באַשטעטיקן די פאַרלענגערונג טעמפּעראַטור צו וועגן 68 ° C און דיזיינינג די פאַרלענגערונג צייט לויט די קורס פון 1 קב/מין קענען ענשור עפעקטיוו אַמפּלאַפאַקיישאַן פון לאַנג פראַגמאַנץ.
די טעות קורס פון PCR אַמפּלאַפאַקיישאַן קענען זיין רידוסט דורך די נוצן פון פאַרשידן דנאַ פּאָלימעראַסעס מיט הויך פאַדעלאַטי. צווישן אַלע די טאַק דנאַ פּאָלימעראַסעס געפֿונען ביז איצט, Pfu ענזיים האט די לאָואַסט טעות קורס און די העכסטן פאַדעלאַטי (זען אַטאַטשט טיש). אין אַדישאַן צו ענזיים סעלעקציע, ריסערטשערז קענען רעדוצירן די PCR מיוטיישאַן קורס דורך אָפּטימיזינג אָפּרוף טנאָים, אַרייַנגערעכנט אָפּטימיזינג באַפער זאַץ, קאַנסאַנטריישאַן פון טערמאָסטאַבלע פּאָלימעראַס און אָפּטימיזינג פּקר ציקל נומער.
פּראָדוקטן קאַטעגאָריעס
וואָס קלייַבן יו
זינט זייַן פאַרלייגן, אונדזער פאַבריק איז דעוועלאָפּינג ערשטער וועלט קלאַס פּראָדוקטן מיט אַדכירינג דעם פּרינציפּ
פון קוואַליטעט ערשטער. אונדזער פּראָדוקטן האָבן גאַינעד ויסגעצייכנט שעם אין די ינדאַסטרי און וואַליאַבלע צוטרוי צווישן נייַע און אַלט קאַסטאַמערז.
- תּל: +86 010-59822688
- בילדינג 5, נומ 86, שואַנגיינג וועסט וועג, טשאַנגפּינג דיסטריקט, בעידזשינג.
- people@tiangen.com
