2 × Taq פּלאַטינום פּקר מיקס

הינטער-ריין האָטסטאַרט טערמאַסטאַבלע דנאַ פּאָלימעראַסע הויך-פאַדעלאַטי.

טאַק פּלאַטינום דנאַ פּאָלימעראַסע איז אַ כעמישער מאַדאַפייד האָטסטאַרט טאַק פּאָלימעראַסע מיט 3'-5 'עקסאָנוקלעאַסע טעטיקייט און 5'-3'עקסאָנוקלעאַסע טעטיקייט. די ענזיים טעטיקייט פון Taq פּלאַטינום דנאַ פּאָלימעראַסע איז אפגעשטעלט ביי צימער טעמפּעראַטור. זיין טעטיקייט קענען זיין אַקטיווייטיד בלויז נאָך באַהיצונג ביי 94 ° C פֿאַר 5-10 מינוט, אַזוי ויסמיידן ניט-ספּעציפיש אַמפּלאַפאַקיישאַן געפֿירט דורך אָנפאַנגער ניט-ספּעציפיש אַנילינג אָדער אָנפאַנגער דימער ביי נידעריק טעמפּעראַטור איידער די ערשט ציקל פון פּקר אָפּרוף, און זייער ימפּרוווינג די סענסיטיוויטי. און ספּעסיפיסיטי פון פּקר אָפּרוף. אין אַדישאַן, Taq פּלאַטינום דנאַ פּאָלימעראַסע האט זייער הויך פאַדעלאַטי, וואָס איז די צווייט בעסטער פֿאַר פּפו פּאָלימעראַסע. די פאַרלענגערונג גיכקייַט פון דנאַ פּאַלימעראַזיישאַן איז פאַסטער ווי פּפו פּאָלימעראַסע און די אַמפּלאַפאַקיישאַן עפעקטיווקייַט איז העכער.

Cat. ניין	פּאַקינג גרייס
4992789	5 קס 1 מל
4992790	5 × 1 מל

שיקן בליצפּאָסט צו אונדז

פּראָדוקט דעטאַל

עקספּערימענטאַל ביישפיל

FAQ

פּראָדוקט טאַגס

טעטיקייט דעפֿיניציע

1 אַפּאַראַט (ו) טאַק פּלאַטינום דנאַ פּאָלימעראַסע טעטיקייט איז דיפיינד ווי די סומע פון ענזיים פארלאנגט צו ינקאָרפּערייט 10 nmol דעאָקסינוקלעאָטידעס אין זויער-ינסאַליאַבאַל סאַבסטאַנסיז ביי 74 ° C אין 30 מינוט מיט אַקטיווייטיד לאַקס זיירע דנאַ ווי מוסטער/אָנפאַנגער.

קוואַליטעט קאָנטראָל

די ריינקייַט דורך SDS-PAGE דיטעקשאַן איז מער ווי 99%; קיין טעטיקייט פון עקסאָגענאָוס נוקלעאַסע איז דיטעקטאַד; איין-קאָפּיע דזשין אין מענטש גענאָמע קען זיין אַמפּלאַפייד יפעקטיוולי; קיין באַטייַטיק טעטיקייט ענדערונג ווען סטאָרד אין צימער טעמפּעראַטור פֿאַר איין וואָך.

הויפּט טעכניש פּאַראַמעטערס

עס האט 5'-3 'עקסאָנוקלעאַסע טעטיקייט און 3'-5'עקסאָנוקלעאַסע טעטיקייט, און זיין פאַדעלאַטי איז ווייַטער צו פּפו פּאָלימעראַסע. די פאַרלענגערונג גיכקייַט פון Taq פּלאַטינום פּאָלימעראַסע איז פאַסטער ווי פּפו פּאָלימעראַסע און די אַמפּלאַפאַקיישאַן עפעקטיווקייַט איז העכער. פּקר פּראָדוקטן קענען זיין גלייך ליגייטיד צו די אָפן סוף אָדער קלאָונד מיט TA וועקטאָר. אויב די קלאָונינג עפעקטיווקייַט דאַרף זיין ימפּרוווד, עס איז רעקאַמענדיד צו ערשטער רייניקן און לייגן 3'-דאַ אָוווערכאַנגז איידער קלאָונינג אין TA וועקטאָר.

איין-רער טאַק פּלאַטינום מאַסטערמיקס (נאַשאַנאַל הויך-טעק פּראָדוקט סערטאַפאַקיישאַן)

■ די טאַק פּלאַטינום מאַסטערמיקס ימפּרוווז ספּעסיפיסיטי און סענסיטיוויטי פון פּקר אָפּרוף און קענען אַמפּלאַפיי קאָמפּלעקס טעמפּלאַטעס מיט הויך גק אינהאַלט, צווייטיק סטרוקטור און די. איר קענען פאַרגיכערן אַרויף צו 2 עקזעמפלארן פון דער ציל מוסטער, וואָס ינשורז מער פּינטלעך יקספּערמענאַל רעזולטאַטן.

■ די יינציק טאַק פּלאַטינום מאַסטערמיקס פאָרמולע מאכט די גאנצע אָפּרוף סיסטעם זייער סטאַביל, און די טעטיקייט וועט נישט זיין אַפעקטאַד דורך ריפּיטיד פרירן-טאָ אָדער לאַנג-טערמין סטאָרידזש ביי 4 ° C.

■ די סטאַביל און עפעקטיוו פּרי-צוגעגרייט פּקר געמישט לייזונג קענען מאַכן די אָפּעראַציע שנעל און פּשוט, זייער רידוסינג אַרבעט ינטענסיטי און מוסטערונג טעות. הויך-פאָרשטעלונג פּקר ענכאַנסער און אָפּטימיזער זענען אויך ינקלודעד אין דעם מישן, וואָס ראַדוסאַז די רעקווירעמענץ פֿאַר פּקר טנאָים.

■ דער פּראָדוקט האט סיסטעמען וואָס אַנטהאַלטן פאַרב און פאַרב. פאַרב מיט מאַסטערמיקס פּראָדוקטן קענען זיין ילעקטראָופאָרעססעד גלייך נאָך פּקר אָן אַדינג לאָודינג באַפער.

אַפּפּליקאַטיאָנס

עס קענען פאַרבייַטן פּפו פּאָלימעראַסע צו אַמפּלאַפיי הויך-פאַדעלאַטי פּראָדוקטן פֿון קאָמפּלעקס טעמפּלאַטעס אַזאַ ווי גענאָמע, און איז פּאַסיק פֿאַר אַפּלאַקיישאַנז אַזאַ ווי קלאָונינג פון אויסדרוק גענעס, מאַפּע ספּעציעלע מיוטיישאַנז און אַנאַליסיס פון איין נוקלעאָטידע פּאָלימאָרפיסם (SNP), עטק.

פּריקאָשאַנז אין דיזיינינג פּקר פּרימערס:

די אָנפאַנגער לענג איז יוזשאַוואַלי 20-25 מער. אָבער, ווען פּערפאָרמינג לאַנג פראַגמענט פּקר, די אָנפאַנגער לענג זאָל זיין געוואקסן צו 30-35 מער.

■ עס איז קיין קאַמפּלאַמענטשי פּערינג צווישן די צוויי פּרימערס, ספּעציעל פֿאַר די לעצטע 3 באַסעס אין די 3 ′ סוף.

■ גק אינהאַלט זאָל זיין 50-60%, און ויסמיידן היגע רייַך גק אָדער אַט. אין סדר צו מאַכן אַ אָנפאַנגער און מוסטער סטאַביל בינדן, ויסמיידן ביי אַ רייַך סטרוקטור אין די 3 ′ סוף.

■ ויסמיידן אָנפאַנגער צו פאָרעם צווייטיק סטרוקטור.

■ סעלעקטירן צוויי אָנפאַנגער מיט טם טעמפּעראַטורעס נאָענט צו יעדער אנדערער.

כעזשבן פון טם ווערט פון פּרימערס פֿאַר פּקר:

■ ווען די אָנפאַנגער איז ווייניקער ווי 20 מער: טם = 2 ° C × (א+ה)+4 ° C × (ג+C).

■ ווען די אָנפאַנגער איז מער ווי 20 מער: טם = 81.5+0.41 × (גק%)-600/ל, ווו ל איז די לענג פון די אָנפאַנגער.

■ באַשטעטיק די אַנילינג טעמפּעראַטור צו (טם -5) ° C.

פּקר אָנפאַנגער אַרייַנשרייַב

די צונעמען לעצט קאַנסאַנטריישאַן פון פּרימערס קענען זיין סעלעקטעד צווישן 0.1 μM און 1.0 μM. צו נידעריק אָנפאַנגער קאַנסאַנטריישאַן פירט צו נידעריק טראָגן פון אַמפּלאַפאַקיישאַן פּראָדוקטן, בשעת צו הויך אָנפאַנגער קאַנסאַנטריישאַן איז מער פּראָנע צו ניט-ספּעציפיש אַמפּלאַפאַקיישאַן. יוזשאַוואַלי, אויב די סומע פון מוסטער דנאַ איז גרויס אָדער קאָמפּלעקס מוסטער דנאַ (אַזאַ ווי מענטשלעך דזשינאָום דנאַ) איז געניצט ווי אַ מוסטער, די אָנפאַנגער קאַנסאַנטריישאַן זאָל זיין נידעריקער. אויב די סומע פון מוסטער דנאַ איז קליין אָדער פּשוט מוסטער דנאַ (למשל, פּלאַסמיד דנאַ, אאז"ו ו) איז געניצט ווי אַ מוסטער, די אָנפאַנגער קאַנסאַנטריישאַן זאָל זיין העכער.

כל די פּראָדוקטן קענען זיין קאַסטאַמייזד פֿאַר אָדם/אָעם. פֿאַר פרטים,ביטע גיט קאַסטאַמייזד סערוויס (אָדם/אָעם)

פֿריִערדיקע: 2 × האָטסטאַרט טאַק פּקר מיקס

ווייטער: 2 × טאַק פּלוס פּקר מיקס

ניצן גענאָמיק דנאַ ווי אַ מוסטער צו פאַרגיכערן 1 קב פראַגמענט. נאָך די פּקר אָפּרוף, נעמען 5 μl פֿאַר דיטעקשאַן פון ילעקטראָופעריסיס.

ק: קיין אַמפּלאַפאַקיישאַן באַנדס

א -1 מוסטער

■ דער מוסטער כּולל פּראָטעין ימפּיוראַטיז אָדער טאַק ינכיבאַטערז עטק .—— רייניקן דנאַ מוסטער, באַזייַטיקן פּראָטעין ימפּיוראַטיז אָדער עקסטראַקט מוסטער דנאַ מיט רייניקונג קיץ.

■ די דענאַטוראַטיאָן פון די מוסטער איז נישט גאַנץ —— אַפּראָופּרייטלי פאַרגרעסערן דענאַטוראַטיאָן טעמפּעראַטור און פאַרלענגערן דענאַטוראַטיאָן צייט.

■ דערנידעריקונג פון מוסטער —— גרייטן דעם מוסטער צוריק.

א -2 אָנפאַנגער

■ נעבעך קוואַליטעט פון אָנפאַנגער —— סינטאַסייז ווידער די אָנפאַנגער.

■ דערנידעריקונג פון אָנפאַנגער —— עלימינירן די הויך קאַנסאַנטריישאַן פּרימערס אין אַ קליין באַנד פֿאַר פּרעזערוויישאַן. ויסמיידן קייפל ייַז קאַלט און טאָינג אָדער לאַנג-טערמין 4 ° C קריאָפּרעסערוועד.

■ ינאַפּראָופּרייט פּלאַן פון אָנפאַנגער (למשל אָנפאַנגער לענג איז נישט גענוג, דימער געשאפן צווישן אָנפאַנגער, עטק.) -רידיזיין אָנפאַנגער (ויסמיידן פאָרמירונג פון אָנפאַנגער דימער און צווייטיק סטרוקטור)

א -3 מג²⁺קאָנצענטראַציע

■ מג²⁺ קאַנסאַנטריישאַן איז צו נידעריק —— רעכט פאַרגרעסערן Mg²⁺קאַנסאַנטריישאַן: אָפּטימיזע די מג²⁺ קאַנסאַנטריישאַן דורך אַ סעריע פון ריאַקשאַנז פון 1 ממ צו 3 ממ מיט אַ מעהאַלעך פון 0.5 ממ צו באַשטימען די אָפּטימאַל מג²⁺ קאַנסאַנטריישאַן פֿאַר יעדער מוסטער און אָנפאַנגער.

א -4 אַנילינג טעמפּעראַטור

■ די הויך אַנילינג טעמפּעראַטור אַפעקץ די ביינדינג פון אָנפאַנגער און מוסטער. - רעדוצירן די אַנילינג טעמפּעראַטור און אַפּטאַמייז די צושטאַנד מיט אַ גראַדיענט פון 2 ° C.

א -5 עקסטענסיאָן צייט

■ קורץ פאַרלענגערונג צייט —— פאַרגרעסערן די פאַרלענגערונג צייט.

ק: פאַלש positive

פענאָמענאַ: נעגאַטיוו סאַמפּאַלז אויך ווייַזן די ציל סיקוואַנס באַנדס.

א -1 קאַנטאַמאַניישאַן פון פּקר

■ קרייז קאַנטאַמאַניישאַן פון ציל סיקוואַנס אָדער אַמפּלאַפאַקיישאַן פּראָדוקטן —— קערפאַלי נישט צו שטעלן די מוסטער מיט די ציל סיקוואַנס אין די נעגאַטיוו מוסטער אָדער פאַרגיסן זיי פֿון די סענטריפוגע רער. די רייידזשאַנץ אָדער ויסריכט זאָל זיין אַוטאָקלאַוועד צו עלימינירן יגזיסטינג נוקלעיק אַסאַדז, און די עקזיסטענץ פון קאַנטאַמאַניישאַן זאָל זיין באשלאסן דורך נעגאַטיוו קאָנטראָל יקספּעראַמאַנץ.

■ רייידזשאַנט קאַנטאַמאַניישאַן —— אַליקאָט די רייידזשאַנץ און סטאָרז ביי נידעריק טעמפּעראַטור.

א -2 פּרייםr

■ מג²⁺ קאַנסאַנטריישאַן איז צו נידעריק —— רעכט פאַרגרעסערן Mg²⁺ קאַנסאַנטריישאַן: אָפּטימיזע די מג²⁺ קאַנסאַנטריישאַן דורך אַ סעריע פון ריאַקשאַנז פון 1 ממ צו 3 ממ מיט אַ מעהאַלעך פון 0.5 ממ צו באַשטימען די אָפּטימאַל מג²⁺ קאַנסאַנטריישאַן פֿאַר יעדער מוסטער און אָנפאַנגער.

■ ימפּראַפּער אָנפאַנגער פּלאַן, און דער ציל סיקוואַנס האט האָמאָלאָגי מיט די ניט-ציל סיקוואַנס. —— ווידער-פּלאַן פּרימערס.

ק: ניט-ספּעציפיש אַמפּלאַפאַקיישאַן

פענאָמענאַ: די פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן באַנדס זענען סתירה מיט די דערוואַרט גרייס, אָדער גרויס אָדער קליין, אָדער טייל מאָל אַ ספּעציפיש אַמפּלאַפאַקיישאַן באַנדס און ניט-ספּעציפיש אַמפּלאַפאַקיישאַן באַנדס פּאַסירן.

א -1 אָנפאַנגער

■ נעבעך אָנפאַנגער ספּעסיפיסיטי

—— ווידער-פּלאַן אָנפאַנגער.

■ די אָנפאַנגער קאַנסאַנטריישאַן איז צו הויך —— רעכט פאַרגרעסערן די דענאַטוראַטיאָן טעמפּעראַטור און פאַרלענגערן די דענאַטוראַטיאָן צייט.

א -2 מג²⁺ קאָנצענטראַציע

■ די מג²⁺ קאַנסאַנטריישאַן איז צו הויך —— ריכטיק רעדוצירן די Mg2+ קאַנסאַנטריישאַן: אָפּטימיזע די מג²⁺ קאַנסאַנטריישאַן דורך אַ סעריע פון ריאַקשאַנז פון 1 ממ צו 3 ממ מיט אַ מעהאַלעך פון 0.5 ממ צו באַשטימען די אָפּטימאַל מג²⁺ קאַנסאַנטריישאַן פֿאַר יעדער מוסטער און אָנפאַנגער.

א -3 טערמאָסטאַבלע פּאָלימעראַסע

■ יבעריק סומע פון ענזיים —— רעדוצירן די סומע פון ענזיים צונעמען אין ינטערוואַלז פון 0.5 יו.

א -4 אַנילינג טעמפּעראַטור

■ די אַנילינג טעמפּעראַטור איז צו נידעריק —— אַפּראָופּרייטלי פאַרגרעסערן די אַנילינג טעמפּעראַטור אָדער אַדאַפּט די צוויי-בינע אַנילינג אופֿן

A-5 פּקר סייקאַלז

■ צו פילע פּקר סייקאַלז —— רעדוצירן די נומער פון פּקר סייקאַלז.

ק: פּאַטשי אָדער שמיר באַנדס

א -1 אָנפאַנגער—— נעבעך ספּעסיפיסיטי —— רע-פּלאַן די אָנפאַנגער, טוישן די שטעלע און לענג פון די אָנפאַנגער צו פאַרבעסערן זייַן ספּעסיפיסיטי; אָדער דורכפירן נעסטעד פּקר.

א -2 מוסטער דנאַ

—— די מוסטער איז נישט ריין —— רייניקן די מוסטער אָדער עקסטראַקט דנאַ מיט רייניקונג קיץ.

א -3 מג²⁺ קאָנצענטראַציע

—— מג²⁺ קאַנסאַנטריישאַן איז צו הויך —— רעכט רעדוצירן מג²⁺ קאַנסאַנטריישאַן: אָפּטימיזע די מג²⁺ קאַנסאַנטריישאַן דורך אַ סעריע פון ריאַקשאַנז פון 1 ממ צו 3 ממ מיט אַ מעהאַלעך פון 0.5 ממ צו באַשטימען די אָפּטימאַל מג²⁺ קאַנסאַנטריישאַן פֿאַר יעדער מוסטער און אָנפאַנגער.

א -4 דנטפּ

—— די קאַנסאַנטריישאַן פון דנטפּס זענען צו הויך —— רעדוצירן די קאַנסאַנטריישאַן פון דנטפּ אַפּראָופּרייטלי

א -5 אַנילינג טעמפּעראַטור

—— צו נידעריק אַנילינג טעמפּעראַטור —— אַפּראָופּרייטלי פאַרגרעסערן די אַנילינג טעמפּעראַטור

א -6 סייקאַלז

—— צו פילע סייקאַלז —— אָפּטימיזע די ציקל נומער

ק: ווי פיל מוסטער דנאַ זאָל זיין מוסיף אין אַ 50 μל פּקר אָפּרוף סיסטעם?

ק: ווי צו פאַרגרעסערן לאַנג פראַגמאַנץ?

דער ערשטער שריט איז צו קלייַבן די צונעמען פּאָלימעראַסע. רעגולער טאַק פּאָלימעראַסע קענען ניט פּרופריד ווייַל פון פעלן פון 3'-5 'עקסאָנוקלעאַסע טעטיקייט, און מיסמאַטש וועט שטארק רעדוצירן די פאַרלענגערונג עפעקטיווקייַט פון פראַגמאַנץ. דעריבער, רעגולער טאַק פּאָלימעראַסע קענען נישט יפעקטיוולי אַמפּלאַפיי ציל פראַגמאַנץ גרעסער ווי 5 קב. טאַק פּאָלימעראַסע מיט ספּעציעל מאַדאַפאַקיישאַן אָדער אנדערע הויך -פאַדעלאַטי פּאָלימעראַס זאָל זיין אויסגעקליבן צו פֿאַרבעסערן די פאַרלענגערונג עפעקטיווקייַט און טרעפן די באדערפענישן פון אַ לאַנג פראַגמענט אַמפּלאַפאַקיישאַן. אין אַדישאַן, די אַמפּלאַפאַקיישאַן פון לאַנג פראַגמאַנץ אויך ריקווייערז קאָראַספּאַנדינג אַדזשאַסטמאַנט פון אָנפאַנגער פּלאַן, דענאַטוראַטיאָן צייט, פאַרלענגערונג צייט, באַפער pH, עטק. כּדי צו פאַרמיידן מוסטער שעדיקן, די דענאַטוראַטיאָן צייט ביי 94 ° C זאָל זיין רידוסט צו 30 סעק אָדער ווייניקער פּער ציקל, און די צייט צו העכערונג טעמפּעראַטור צו 94 ° C איידער אַמפּלאַפאַקיישאַן זאָל זיין ווייניקער ווי 1 מין. דערצו, באַשטעטיקן די פאַרלענגערונג טעמפּעראַטור צו וועגן 68 ° C און דיזיינינג די פאַרלענגערונג צייט לויט די קורס פון 1 קב/מין קענען ענשור עפעקטיוו אַמפּלאַפאַקיישאַן פון לאַנג פראַגמאַנץ.

ק: ווי צו פֿאַרבעסערן די אַמפּלאַפאַקיישאַן פאַדעלאַטי פון PCR?

די טעות קורס פון PCR אַמפּלאַפאַקיישאַן קענען זיין רידוסט דורך די נוצן פון פאַרשידן דנאַ פּאָלימעראַסעס מיט הויך פאַדעלאַטי. צווישן אַלע די טאַק דנאַ פּאָלימעראַסעס געפֿונען ביז איצט, Pfu ענזיים האט די לאָואַסט טעות קורס און די העכסטן פאַדעלאַטי (זען אַטאַטשט טיש). אין אַדישאַן צו ענזיים סעלעקציע, ריסערטשערז קענען רעדוצירן די PCR מיוטיישאַן קורס דורך אָפּטימיזינג אָפּרוף טנאָים, אַרייַנגערעכנט אָפּטימיזינג באַפער זאַץ, קאַנסאַנטריישאַן פון טערמאָסטאַבלע פּאָלימעראַס און אָפּטימיזינג פּקר ציקל נומער.

שרייב דיין אָנזאָג דאָ און שיקן עס צו אונדז

פּראָדוקטן קאַטעגאָריעס

וואָס קלייַבן יו

זינט זייַן פאַרלייגן, אונדזער פאַבריק איז דעוועלאָפּינג ערשטער וועלט קלאַס פּראָדוקטן מיט אַדכירינג דעם פּרינציפּ
פון קוואַליטעט ערשטער. אונדזער פּראָדוקטן האָבן גאַינעד ויסגעצייכנט שעם אין די ינדאַסטרי און וואַליאַבלע צוטרוי צווישן נייַע און אַלט קאַסטאַמערז.

אָנפרעג