בלוט דירעקט פּקר קיט

גיך אַמפּלאַפאַקיישאַן פון די ציל דזשין גלייך ניצן בלוט ווי אַ מוסטער אָן יקסטראַקשאַן.

דער קיט אַדאַפּט אַ דזשאַנעטיקלי ענדזשאַנירד אַנטי-ינכיבאַטער דנאַ פּאָלימעראַסע צו יפעקטיוולי אַמפּלאַפיי איין-קאָפּיע גענעס אין די מענטשלעך דזשינאָום. די געזונט אָפּטימיזעד באַפער סיסטעם אין דעם קיט העלפּס די פּאָלימעראַסע שטארק אַנטקעגנשטעלנ די ינאַבישאַן פון פּקר ינכיבאַטערז, און קענען אַמפּלאַפיי דנאַ גלייך מיט בלוט און קאַלטשערד סעלז ווי טעמפּלאַטעס. דער פּראָדוקט איז גרינג צו אַרבעטן און דאַרף נישט קאָמפּליצירט סטעפּס אַזאַ ווי דנאַ רייניקונג אָדער מוסטער פאַר -באַהאַנדלונג.
דער קיט איז צוגעשטעלט ווי 2 × MasterMix, און דער אָפּרוף קענען זיין דורכגעקאָכט דורך אַדינג די בלוט מוסטער און קאָראַספּאַנדינג דיטעקשאַן פּרימערס. עס קענען זיין געווענדט אויף די קאַלטשערד סעלז פון מאַמאַלז אַזאַ ווי יומאַנז, מיסע, פּיגס, פיך און אנדערע מינים, און פריש אָדער 4 ℃ קריאָפּרעסערוועד גאַנץ בלוט, אַנטיקאָאַגולאַנט (EDTA, סיטראַטע, העפּאַרין), ליקוואַפייד בלוט קלאַץ און טרוקן בלוט ספּאַץ סטאָרד אויף די געשעפט קאַרדס פון Whatman 903 און FTA Elute.

Cat. ניין פּאַקינג גרייס
4992529 20 µl × 100 רקסנומקס
4992530 20 µl × 500 רקסנומקס

פּראָדוקט דעטאַל

עקספּערימענטאַל ביישפיל

FAQ

פּראָדוקט טאַגס

איינריכטונגען

■ פּשוט און געשווינד: פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן קענען זיין גלייך דורכגעקאָכט מיט בלוט ווי אַ מוסטער, אָן די נויטיק סטעפּס פון מוסטער צוגרייטונג און דנאַ יקסטראַקשאַן.
■ הויך ריינקייַט: די פאַרהיטונג פון מוסטער פאַר-באַהאַנדלונג און דנאַ יקסטראַקשאַן סטעפּס קענען העלפֿן ויסמיידן קרייַז-קאַנטאַמאַניישאַן פון סאַמפּאַלז.
■ הויך טרופּוט: די פּקר לעגיטימאַציע פֿאַר גרויס סאַמפּאַלז קענען זיין דורכגעקאָכט דורך קאַמביינינג די ינווענטאַר מיט 96/384-געזונט פּקר פּלאַטעס.
■ שטאַרק וניווערסאַליטי: דעם קיט קענען יפעקטיוולי אַמפּלאַפיי הויך גק פראַגמאַנץ אָדער פראַגמאַנץ מיט קאָמפּלעקס צווייטיק סטרוקטור, און די אַמפּלאַפאַקיישאַן לענג קענען זיין אַרויף צו 5 קב.
■ שטאַרק דרוק קעגנשטעל: דעם קיט קענען זיין געווענדט פֿאַר פאַרשידן מינים און בלוט סאַמפּאַלז אפגעהיט אין פאַרשידענע וועגן.

אַפּפּליקאַטיאָנס

די פּקר פּראָדוקטן פון דעם ינווענטאַר כּולל "א" אין די 3'-סוף, וואָס קענען זיין געוויינט גלייך פֿאַר טאַ וועקטאָר קלאָונינג. דער קיט קענען ווערן גענוצט פֿאַר אַמפּלאַפאַקיישאַן פון גענאָמיק דנאַ פראַגמאַנץ, הויך-טרופּוט גענעטיק אַנאַליסיס און גענאָטיפּינג (אַזאַ ווי דזשין דיטעקשאַן) אַנאַליסיס.

כל די פּראָדוקטן קענען זיין קאַסטאַמייזד פֿאַר אָדם/אָעם. פֿאַר פרטים,ביטע גיט קאַסטאַמייזד סערוויס (אָדם/אָעם)


  • פֿריִערדיקע:
  • ווייטער:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×
    Experimental Example ניצן מענטש EDTA אַנטיקאָאַגולאַטיאָן ווי אַ מוסטער, 4 גענעס מיט פאַרשידענע גק אינהאַלט זענען אַמפּלאַפייד דורך בלוט דירעקט פּקר קיט. די פּקר אָפּרוף סיסטעם איז 20 μl, און 1 μl בלוט איז געניצט ווי אַ מוסטער.
    ב: טיאַנגען מאַרקער וו; 1: פראַגמענט גרייס 1090 בפּ, גק צופרידן 68.1%; 2: פראַגמענט גרייס 1915 בפּ, גק אינהאַלט 70.4%; 3: פראַגמענט גרייס 448 בפּ, גק אינהאַלט 74.8%; 4: פראַגמענט גרייס 1527 בפּ, גק אינהאַלט 61.5%.
    עקספּערימענטאַל רעזולטאַטן: בלוט דירעקט פּקר קיט קענען יפעקטיוולי אַמפּלאַפיי דנאַ פראַגמאַנץ מיט די גק אינהאַלט אין די קייט פון 61.5%-74.8%, סאַגדזשעסטינג אַז עס איז ביכולת צו אַמפּלאַפיי הויך-גק פראַגמאַנץ.
    Experimental Example ניצן מענטש EDTA אַנטיקאָאַגולאַטיאָן ווי אַ מוסטער, 5 גענעס מיט פאַרשידענע לענגקטס (ActB, Prp, DN1.0, Hn2.0 און Hn4.0) זענען אַמפּלאַפייד דורך בלוט דירעקט פּקר קיט. די פּקר אָפּרוף סיסטעם איז 20 μl, און 1 μl בלוט איז געניצט ווי אַ מוסטער.
    ב: טיאַנגען מאַרקער וו; 1-3: 3 פאַרשידענע בלוט סאַמפּאַלז; נטק: קאָנטראָל אָן אָנפאַנגער. יקספּערמענאַל רעזולטאַטן: בלוט דירעקט פּקר קיט קענען אַמפּלאַפיי פראַגמאַנץ מיט אַ לענג פון 4 קב, וואָס סאַגדזשעסץ אַז עס איז ביכולת צו אַמפּלאַפיי לאַנג פראַגמאַנץ.
    Experimental Example Blood Direct PCR קיט, מיט מענטשלעך EDTA אַנטיקאָאַגולאַטיאָן ווי אַ מוסטער, איז געניצט פֿאַר פּקר דיטעקשאַן פון פאַרשידענע בלוט סאַמפּאַלז. די פּקר אָפּרוף סיסטעם איז 20 μl, און 1 μl בלוט איז געניצט ווי אַ מוסטער.
    ב: טיאַנגען מאַרקער וו; 1-9: די לאָודינג סומע פון ​​בלוט איז ריספּעקטיוולי 0.1 μl, 0.2 μl, 0.3 μl, 0.4 μl, 1 μl, 2 μl, 3 μl, 4 μl און 5 μl; נטק: קאָנטראָל אָן מוסטער
    יקספּערמענאַל רעזולטאַטן: בלוט דירעקט פּקר קיט האט שטאַרק קעגנשטעל צו בלוט און קענען אַמפּלאַפיי בלוט סאַמפּאַלז מיט אַ לאָודינג קייט פון 0.1-5 μl.
    Experimental Example בלוט סאַמפּאַלז פון מענטשן, שטשור, הינדל און אנדערע מינים מיט פאַרשידענע טריטמאַנץ זענען געניצט ווי טעמפּלאַטעס. בלוט דירעקט פּקר קיט איז גענוצט צו פאַרגיכערן PRNP (מענטשלעך, 750 בפּ), אַקטין (שטשור, 200 בפּ) און β- אַקטין (טשיקקען, 1.0 קב). די פּקר אָפּרוף סיסטעם איז 20 μl, און 1 μl בלוט איז געניצט ווי אַ מוסטער. ב: טיאַנגען מאַרקער וו.
    יקספּערמענאַל רעזולטאַטן: בלוט דירעקט פּקר קיט קענען זיין געווענדט אויף אַ ברייט קייט פון סאַמפּאַלז, און די דירעקט פּקר דיטעקשאַן קענען זיין דורכגעקאָכט אויף בלוט סאַמפּאַלז פון פאַרשידן מינים מיט פאַרשידענע טריטמאַנץ.
    ק: קיין אַמפּלאַפאַקיישאַן באַנדס

    א -1 מוסטער

    ■ דער מוסטער כּולל פּראָטעין ימפּיוראַטיז אָדער טאַק ינכיבאַטערז עטק .—— רייניקן דנאַ מוסטער, באַזייַטיקן פּראָטעין ימפּיוראַטיז אָדער עקסטראַקט מוסטער דנאַ מיט רייניקונג קיץ.

    ■ די דענאַטוראַטיאָן פון די מוסטער איז נישט גאַנץ —— אַפּראָופּרייטלי פאַרגרעסערן דענאַטוראַטיאָן טעמפּעראַטור און פאַרלענגערן דענאַטוראַטיאָן צייט.

    ■ דערנידעריקונג פון מוסטער —— גרייטן דעם מוסטער צוריק.

    א -2 אָנפאַנגער

    ■ נעבעך קוואַליטעט פון אָנפאַנגער —— סינטאַסייז ווידער די אָנפאַנגער.

    ■ דערנידעריקונג פון אָנפאַנגער —— עלימינירן די הויך קאַנסאַנטריישאַן פּרימערס אין אַ קליין באַנד פֿאַר פּרעזערוויישאַן. ויסמיידן קייפל ייַז קאַלט און טאָינג אָדער לאַנג-טערמין 4 ° C קריאָפּרעסערוועד.

    ■ ינאַפּראָופּרייט פּלאַן פון אָנפאַנגער (למשל אָנפאַנגער לענג איז נישט גענוג, דימער געשאפן צווישן אָנפאַנגער, עטק.) -רידיזיין אָנפאַנגער (ויסמיידן פאָרמירונג פון אָנפאַנגער דימער און צווייטיק סטרוקטור)

    א -3 מג2+קאָנצענטראַציע

    ■ מג2+ קאַנסאַנטריישאַן איז צו נידעריק —— רעכט פאַרגרעסערן Mg2+ קאַנסאַנטריישאַן: אָפּטימיזע די מג2+ קאַנסאַנטריישאַן דורך אַ סעריע פון ​​ריאַקשאַנז פון 1 ממ צו 3 ממ מיט אַ מעהאַלעך פון 0.5 ממ צו באַשטימען די אָפּטימאַל מג2+ קאַנסאַנטריישאַן פֿאַר יעדער מוסטער און אָנפאַנגער.

    א -4 אַנילינג טעמפּעראַטור

    ■ די הויך אַנילינג טעמפּעראַטור אַפעקץ די ביינדינג פון אָנפאַנגער און מוסטער. - רעדוצירן די אַנילינג טעמפּעראַטור און אַפּטאַמייז די צושטאַנד מיט אַ גראַדיענט פון 2 ° C.

    א -5 עקסטענסיאָן צייט

    ■ קורץ פאַרלענגערונג צייט —— פאַרגרעסערן די פאַרלענגערונג צייט.

    ק: פאַלש positive

    פענאָמענאַ: נעגאַטיוו סאַמפּאַלז אויך ווייַזן די ציל סיקוואַנס באַנדס.

    א -1 קאַנטאַמאַניישאַן פון פּקר

    ■ קרייז קאַנטאַמאַניישאַן פון ציל סיקוואַנס אָדער אַמפּלאַפאַקיישאַן פּראָדוקטן —— קערפאַלי נישט צו שטעלן די מוסטער מיט די ציל סיקוואַנס אין די נעגאַטיוו מוסטער אָדער פאַרגיסן זיי פֿון די סענטריפוגע רער. די רייידזשאַנץ אָדער ויסריכט זאָל זיין אַוטאָקלאַוועד צו עלימינירן יגזיסטינג נוקלעיק אַסאַדז, און די עקזיסטענץ פון קאַנטאַמאַניישאַן זאָל זיין באשלאסן דורך נעגאַטיוו קאָנטראָל יקספּעראַמאַנץ.

    ■ רייידזשאַנט קאַנטאַמאַניישאַן —— אַליקאָט די רייידזשאַנץ און סטאָרז ביי נידעריק טעמפּעראַטור.

    א -2 פּרייםr

    ■ מג2+ קאַנסאַנטריישאַן איז צו נידעריק —— רעכט פאַרגרעסערן Mg2+ קאַנסאַנטריישאַן: אָפּטימיזע די מג2+ קאַנסאַנטריישאַן דורך אַ סעריע פון ​​ריאַקשאַנז פון 1 ממ צו 3 ממ מיט אַ מעהאַלעך פון 0.5 ממ צו באַשטימען די אָפּטימאַל מג2+ קאַנסאַנטריישאַן פֿאַר יעדער מוסטער און אָנפאַנגער.

    ■ ימפּראַפּער אָנפאַנגער פּלאַן, און דער ציל סיקוואַנס האט האָמאָלאָגי מיט די ניט-ציל סיקוואַנס. —— ווידער-פּלאַן פּרימערס.

    ק: ניט-ספּעציפיש אַמפּלאַפאַקיישאַן

    פענאָמענאַ: די פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן באַנדס זענען סתירה מיט די דערוואַרט גרייס, אָדער גרויס אָדער קליין, אָדער טייל מאָל אַ ספּעציפיש אַמפּלאַפאַקיישאַן באַנדס און ניט-ספּעציפיש אַמפּלאַפאַקיישאַן באַנדס פּאַסירן.

    א -1 אָנפאַנגער

    ■ נעבעך אָנפאַנגער ספּעסיפיסיטי

    —— ווידער-פּלאַן אָנפאַנגער.

    ■ די אָנפאַנגער קאַנסאַנטריישאַן איז צו הויך —— רעכט פאַרגרעסערן די דענאַטוראַטיאָן טעמפּעראַטור און פאַרלענגערן די דענאַטוראַטיאָן צייט.

    א -2 מג2+ קאָנצענטראַציע

    ■ די מג2+ קאַנסאַנטריישאַן איז צו הויך —— ריכטיק רעדוצירן די Mg2+ קאַנסאַנטריישאַן: אָפּטימיזע די מג2+ קאַנסאַנטריישאַן דורך אַ סעריע פון ​​ריאַקשאַנז פון 1 ממ צו 3 ממ מיט אַ מעהאַלעך פון 0.5 ממ צו באַשטימען די אָפּטימאַל מג2+ קאַנסאַנטריישאַן פֿאַר יעדער מוסטער און אָנפאַנגער.

    א -3 טערמאָסטאַבלע פּאָלימעראַסע

    ■ יבעריק סומע פון ​​ענזיים —— רעדוצירן די סומע פון ​​ענזיים צונעמען אין ינטערוואַלז פון 0.5 יו.

    א -4 אַנילינג טעמפּעראַטור

    ■ די אַנילינג טעמפּעראַטור איז צו נידעריק —— אַפּראָופּרייטלי פאַרגרעסערן די אַנילינג טעמפּעראַטור אָדער אַדאַפּט די צוויי-בינע אַנילינג אופֿן

    A-5 פּקר סייקאַלז

    ■ צו פילע פּקר סייקאַלז —— רעדוצירן די נומער פון פּקר סייקאַלז.

    ק: פּאַטשי אָדער שמיר באַנדס

    א -1 אָנפאַנגער—— נעבעך ספּעסיפיסיטי —— רע-פּלאַן די אָנפאַנגער, טוישן די שטעלע און לענג פון די אָנפאַנגער צו פאַרבעסערן זייַן ספּעסיפיסיטי; אָדער דורכפירן נעסטעד פּקר.

    א -2 מוסטער דנאַ

    —— די מוסטער איז נישט ריין —— רייניקן די מוסטער אָדער עקסטראַקט דנאַ מיט רייניקונג קיץ.

    א -3 מג2+ קאָנצענטראַציע

    —— מג2+ קאַנסאַנטריישאַן איז צו הויך —— רעכט רעדוצירן מג2+ קאַנסאַנטריישאַן: אָפּטימיזע די מג2+ קאַנסאַנטריישאַן דורך אַ סעריע פון ​​ריאַקשאַנז פון 1 ממ צו 3 ממ מיט אַ מעהאַלעך פון 0.5 ממ צו באַשטימען די אָפּטימאַל מג2+ קאַנסאַנטריישאַן פֿאַר יעדער מוסטער און אָנפאַנגער.

    א -4 דנטפּ

    —— די קאַנסאַנטריישאַן פון דנטפּס זענען צו הויך —— רעדוצירן די קאַנסאַנטריישאַן פון דנטפּ אַפּראָופּרייטלי

    א -5 אַנילינג טעמפּעראַטור

    —— צו נידעריק אַנילינג טעמפּעראַטור —— אַפּראָופּרייטלי פאַרגרעסערן די אַנילינג טעמפּעראַטור

    א -6 סייקאַלז

    —— צו פילע סייקאַלז —— אָפּטימיזע די ציקל נומער

    ק: ווי פיל מוסטער דנאַ זאָל זיין מוסיף אין אַ 50 μל פּקר אָפּרוף סיסטעם?
    ytry
    ק: ווי צו פאַרגרעסערן לאַנג פראַגמאַנץ?

    דער ערשטער שריט איז צו קלייַבן די צונעמען פּאָלימעראַסע. רעגולער טאַק פּאָלימעראַסע קענען ניט פּרופריד ווייַל פון פעלן פון 3'-5 'עקסאָנוקלעאַסע טעטיקייט, און מיסמאַטש וועט שטארק רעדוצירן די פאַרלענגערונג עפעקטיווקייַט פון פראַגמאַנץ. דעריבער, רעגולער טאַק פּאָלימעראַסע קענען נישט יפעקטיוולי אַמפּלאַפיי ציל פראַגמאַנץ גרעסער ווי 5 קב. טאַק פּאָלימעראַסע מיט ספּעציעל מאַדאַפאַקיישאַן אָדער אנדערע הויך -פאַדעלאַטי פּאָלימעראַס זאָל זיין אויסגעקליבן צו פֿאַרבעסערן די פאַרלענגערונג עפעקטיווקייַט און טרעפן די באדערפענישן פון אַ לאַנג פראַגמענט אַמפּלאַפאַקיישאַן. אין אַדישאַן, די אַמפּלאַפאַקיישאַן פון לאַנג פראַגמאַנץ אויך ריקווייערז קאָראַספּאַנדינג אַדזשאַסטמאַנט פון אָנפאַנגער פּלאַן, דענאַטוראַטיאָן צייט, פאַרלענגערונג צייט, באַפער pH, עטק. כּדי צו פאַרמיידן מוסטער שעדיקן, די דענאַטוראַטיאָן צייט ביי 94 ° C זאָל זיין רידוסט צו 30 סעק אָדער ווייניקער פּער ציקל, און די צייט צו העכערונג טעמפּעראַטור צו 94 ° C איידער אַמפּלאַפאַקיישאַן זאָל זיין ווייניקער ווי 1 מין. דערצו, באַשטעטיקן די פאַרלענגערונג טעמפּעראַטור צו וועגן 68 ° C און דיזיינינג די פאַרלענגערונג צייט לויט די קורס פון 1 קב/מין קענען ענשור עפעקטיוו אַמפּלאַפאַקיישאַן פון לאַנג פראַגמאַנץ.

    ק: ווי צו פֿאַרבעסערן די אַמפּלאַפאַקיישאַן פאַדעלאַטי פון PCR?

    די טעות קורס פון PCR אַמפּלאַפאַקיישאַן קענען זיין רידוסט דורך די נוצן פון פאַרשידן דנאַ פּאָלימעראַסעס מיט הויך פאַדעלאַטי. צווישן אַלע די טאַק דנאַ פּאָלימעראַסעס געפֿונען ביז איצט, Pfu ענזיים האט די לאָואַסט טעות קורס און די העכסטן פאַדעלאַטי (זען אַטאַטשט טיש). אין אַדישאַן צו ענזיים סעלעקציע, ריסערטשערז קענען רעדוצירן די PCR מיוטיישאַן קורס דורך אָפּטימיזינג אָפּרוף טנאָים, אַרייַנגערעכנט אָפּטימיזינג באַפער זאַץ, קאַנסאַנטריישאַן פון טערמאָסטאַבלע פּאָלימעראַס און אָפּטימיזינג פּקר ציקל נומער.

    שרייב דיין אָנזאָג דאָ און שיקן עס צו אונדז