TGuide סעלז/געוועב/פּלאַנט רנאַ קיט

א -1 צעל ליסיס אָדער האָמאָגעניזאַטיאָן איז נישט גענוג

---- רעדוצירן מוסטער באַניץ, פאַרגרעסערן די סומע פון ​​ליסיס באַפער, פאַרגרעסערן כאָומאַדזשאַניזיישאַן און ליסיס צייט.

א -2 מוסטערונג סומע איז צו גרויס

---- רעדוצירן די סומע פון ​​מוסטער געניצט אָדער פאַרגרעסערן די סומע פון ​​ליסיס באַפער.

א -1 ניט גענוגיק צעל ליסיס אָדער האָמאָגעניזאַטיאָן

---- רעדוצירן מוסטער באַניץ, פאַרגרעסערן די סומע פון ​​ליסיס באַפער, פאַרגרעסערן כאָומאַדזשאַניזיישאַן און ליסיס צייט.

א -2 מוסטערונג סומע איז צו גרויס

---- ביטע אָפּשיקן צו די מאַקסימום פּראַסעסינג קאַפּאַציטעט.

A-3 RNA איז נישט יליטיד גאָר פֿון דעם זייַל

---- נאָך אַדינג RNase- פריי וואַסער, לאָזן עס פֿאַר אַ ביסל מינוט איידער סענטריפוגינג.

א -4 עטאַנאָל אין די ילוענט

---- נאָך רינסינג, סענטריפוגע ווידער און באַזייַטיקן די וואַשינג באַפער ווי פיל ווי מעגלעך.

A-5 צעל קולטור מיטל איז נישט גאָר אַוועקגענומען

---- ווען קאַלעקטינג סעלז, ביטע באַזייַטיקן די קולטור מיטל ווי פיל ווי מעגלעך.

A-6 די סעלז סטאָרד אין RNAstore זענען נישט יפעקטיוולי סענטריפוגעד

---- רנאַ סטאָר געדיכטקייַט איז גרעסער ווי די דורכשניטלעך צעל קולטור מיטל; אַזוי די סענטריפוגאַל קראַפט זאָל זיין געוואקסן. עס איז רעקאַמענדיד צו סענטראַפיודזש ביי 3000 קס ג.

A-7 נידעריק רנאַ אינהאַלט און זעט אין דער מוסטער

---- ניצן אַ positive מוסטער צו באַשליסן צי דער נידעריק טראָגן איז געפֿירט דורך די מוסטער.

א -1 דער מאַטעריאַל איז נישט פריש

---- פריש געוועבן זאָל זיין סטאָרד אין פליסיק ניטראָגען גלייך אָדער גלייך אין די RNAstore רייידזשאַנט צו ענשור די יקסטראַקשאַן ווירקונג.

א -2 מוסטערונג סומע איז צו גרויס

---- רעדוצירן מוסטער סומע.

A-3 RNase קאַנטאַמאַניישאַןn

---- כאָטש דער באַפער צוגעשטעלט אין דעם ינווענטאַר כּולל נישט RNase, עס איז גרינג צו קאַנטאַמאַנייט RNase בעשאַס יקסטראַקשאַן פּראָצעס און זאָל זיין כאַנדאַלד מיט זאָרג.

א -4 עלעקטראָפאָרעסע פאַרפּעסטיקונג

---- פאַרבייַטן די ילעקטראָופעריסיס באַפער און מאַכן זיכער אַז די קאָנסומאַבלעס און לאָודינג באַפער זענען פריי פון RNase קאַנטאַמאַניישאַן.

א -5 צו פיל לאָודינג פֿאַר ילעקטראָופעריסיס

---- רעדוצירן די סומע פון ​​מוסטער לאָודינג, די לאָודינג פון יעדער געזונט זאָל נישט יקסיד 2 μ ג.

א -1 מוסטערונג סומע איז צו גרויס

---- רעדוצירן מוסטער סומע.

A-2 עטלעכע סאַמפּאַלז האָבן אַ הויך דנאַ אינהאַלט און קענען זיין באהאנדלט מיט DNase.

---- דורכפירן רנאַסע-פריי דנאַסע באַהאַנדלונג צו די באקומען רנאַ לייזונג, און די רנאַ קענען זיין גלייך געוויינט פֿאַר סאַבסאַקוואַנט יקספּעראַמאַנץ נאָך באַהאַנדלונג, אָדער קענען זיין ווייַטער פּיוראַפייד דורך רנאַ רייניקונג קיץ.

פֿאַר גלאַסווער, בייקט ביי 150 ° C פֿאַר 4 שעה. פֿאַר פּלאַסטיק קאַנטיינערז, געטובלט אין 0.5 ם נאַאָה פֿאַר 10 מינוט, דאַן ונ דורך רינסעד מיט RNase- פריי וואַסער און סטעראַלייז צו גאָר באַזייַטיקן RNase. די רייידזשאַנץ אָדער סאַלושאַנז געניצט אין דעם עקספּערימענט, ספּעציעל וואַסער, מוזן זיין פריי פון RNase. ניצן רנאַסע-פריי וואַסער פֿאַר אַלע רייידזשאַנט פּרעפּעריישאַנז (לייג וואַסער צו אַ ריין גלאז פלאַש, לייג DEPC צו אַ לעצט קאַנסאַנטריישאַן פון 0.1% (V/V), טרייסלען יבערנאַכטיק און אַוטאָקלאַווע).